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雞卵泡顆粒細(xì)胞的保存方法

更新時間:2019-07-25  |  點擊率:1605

        細(xì)胞簡介:

        雞卵泡顆粒細(xì)胞分離自 PMSG 誘導(dǎo)后 3 天的雞卵巢組織,顆粒細(xì)胞是卵巢的主要功能細(xì)胞,其增殖與分化直接影響著卵泡的生長啟動、發(fā)育、排卵、黃體形成以及甾體激素分泌等卵巢功能活動。細(xì)胞形狀呈圓形或橢圓形。本公司生產(chǎn)的雞卵泡顆粒細(xì)胞采用機械分離法制備而來,細(xì)胞總量約為 5×105 個/瓶,細(xì)胞純度可達(dá) 80%以上,且不含有 HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

        一、使用方法

        客戶收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作。(該細(xì)胞傳代次數(shù)有限約 2 代,建議客戶收到細(xì)胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1.取出細(xì)胞瓶,75%酒精消毒后拆下封口膜,放入 37℃,5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2.待細(xì)胞達(dá)到 80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3.細(xì)胞傳代:

1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基,用 PBS 清洗細(xì)胞一次。

2)加入 0.125%胰蛋白酶消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中,37℃消化 3min 左右;顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻,按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至 5mL,放入 37℃ 5% CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細(xì)胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察,每隔 2-3 天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

        二、注意事項

1.培養(yǎng)基于生化培養(yǎng)箱4℃條件下可保存 3-6 個月。

2.在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。

3.傳代培養(yǎng)過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。

4.該細(xì)胞只可用于科研。

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