結(jié)核分枝桿菌為細(xì)長(zhǎng)略帶彎曲的桿菌,大小1~4X0.4μm。牛分枝桿菌則比較粗短。分枝桿菌屬的細(xì)菌細(xì)胞壁脂質(zhì)含量較高,約占干重的60%,特別是有大量 分枝菌酸(mycolic acid)包圍在肽聚糖層的外面,可影響染料的穿入。分枝桿菌一般用齊尼(Ziehl- Neelsen)抗酸染色法,以5% 石炭酸復(fù)紅加溫染色后可以染上,但用3%鹽酸乙醇不易脫色。若再加用美藍(lán)復(fù)染,則分枝桿菌呈紅色,而其他細(xì)菌和背景中的物質(zhì)為藍(lán)色。本菌無(wú)芽孢、無(wú)鞭毛。
本菌為專性需氧菌,在元氧條件下迅速死亡。為兼性細(xì)胞內(nèi)寄生菌,在細(xì)胞內(nèi)外均可發(fā)育繁殖,強(qiáng)毒菌株可長(zhǎng)期生存于巨噬細(xì)胞內(nèi)。生長(zhǎng)條件電熱恒溫培養(yǎng)箱37℃,pH6.4-7.0。具有強(qiáng)的疏水性,菌落不易乳化于水及生理鹽水。 繁殖周期較多數(shù)細(xì)菌長(zhǎng),在合適培養(yǎng)基上至少14-15h繁殖一代。群體生長(zhǎng)于以雞蛋為基礎(chǔ)的固體培養(yǎng)基上,初次分離需4-8周,次代培養(yǎng)仍需2-4周。營(yíng)養(yǎng)要求尤高,需要卵黃、血液、馬鈴薯淀粉等有機(jī)物質(zhì),碳、氮、磷、鉀、鎂、鐵等無(wú)機(jī)鹽類以及氨基酸、菸酸、核黃素等。
結(jié)核菌分枝桿菌MAX適溫度為電熱恒溫培養(yǎng)箱37℃,低于30℃不生長(zhǎng)。結(jié)核分枝桿菌細(xì)胞壁的脂質(zhì)含量較高,影響營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收,故生長(zhǎng)緩慢。在一般培養(yǎng)基中每分裂1代需時(shí)18~24小時(shí),營(yíng)養(yǎng)豐富時(shí)只需5小時(shí)。
初次分離需要營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基。常用的有羅氏(Lowenstein-Jensen)固體培養(yǎng)基,內(nèi)含蛋黃、甘油、馬鈴薯、無(wú)機(jī)鹽和孔雀綠等??兹妇G可抑制雜菌生長(zhǎng),便于分離和長(zhǎng)期培養(yǎng)。蛋黃含脂質(zhì)生長(zhǎng)因子,能刺激生長(zhǎng)。根據(jù)接種菌多少,一般2~4周可見(jiàn)菌落生長(zhǎng)。菌落呈顆粒、結(jié)節(jié)或花菜狀,乳白色或米黃色,不透明。在液體培養(yǎng)基中可能由于接觸營(yíng)養(yǎng)面大,細(xì)菌生長(zhǎng)較為迅速。一般1~2周即可生長(zhǎng)。臨床標(biāo)本檢查液體培養(yǎng)比固體培養(yǎng)的陽(yáng)性率高數(shù)倍。
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